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PCR实验室为什么会出现污染?
- 2021-10-18-

PCR实验室为什么会出现污染?

       PCR实验室又称基因扩增实验室,是一种利用分子生物学技术扩增核酸片段,也可以作为一种特定的核酸体外复制。PCR技术已在传染病.肿瘤靶向性.生殖遗传学等领域得到广泛应用,但由于该技术对核酸进行了大量的检测,因此,即使少量的污染也很容易导致假阳性结果。二是PCR实验室的建设要求较高,过程复杂,若中间环节有疏漏,则可能造成假阴性。

在进行PCR实验室试验时,容易产生污染,其主要原因有四种:

1.PCR产物污染。在PCR实验室建设中,这是造成污染的一个常见原因,PCR产物经反复扩增后复制量远大于PCR的检测限值,所以即使少量的污染也足以产生假阳性。

2.污染试剂。配制试剂时,试剂因接触污染的容器.移液管.移液器吸头.溶液等被污染。

3.要检测的样品受到污染。放样的容器受到污染,或者因容器密封不严而污染样本;第二,污染的移液器或移液器吸头用于核酸提取时,PCR实验室被污染了,另外,一些样品中含有杂质,如果这些杂质扩散到空气中,就会产生交叉污染。

4.悬浮污染。若悬浮微粒含有病毒和其它污染物,扩散到空气中,就有可能污染PCR实验室,这是由于空气与液体表面摩擦而产生的。开启瓶盖,摇动反应管,反复吸入污染进样器,会形成气溶胶,造成交叉污染,据计算,一个气溶胶颗粒可能含有四万八千份,因此,对气溶胶造成的污染要特别注意。

5.一旦PCR实验室被污染,前一次检测结果失效,其它实验操作无法进行,因此,必须对污染源进行彻底清理,以取得准确有效的试验结果。